Σταθερότητα ELISA ≤ ± 0,003Abs Δοκιμαστής μυκοτοξίνης ST-2000A Περιοχή μήκους κύματος 400-900nm

ST-2000A Ελεγκτής μυκοτοξινών

Ο αναλυτής μυκοτοξίνης ST-2000A είναι ένα απαραίτητο αναλυτικό όργανο για την αφλατοξίνη και την ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία. Η αρχή της στερεάς φάσης ενζυμικά συνδεδεμένης ανοσοπροσροφητικής δοκιμασίας (ELISA), συγκεκριμένα της ενζυμικής ανοσοπροσροφητικής δοκιμασίας (ELISA), αποτελείται από αυτό το όργανο και το κιτ Β1, το οποίο μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον προσδιορισμό της περιεκτικότητας σε αφλατοξίνη Β1 και άλλες μυκοτοξίνες στα δείγματα. με περιορισμένο και ποσοτικό τρόπο (εάν είναι εξοπλισμένο με άλλα κιτ, μπορούν να ανιχνευθούν άλλες τοξίνες). Χρησιμοποιείται ευρέως στην ανίχνευση της αφλατοξίνης Β1 και άλλων μυκοτοξινών σε τρόφιμα, ζωοτροφές, λάδι, γαλακτοκομικά προϊόντα, φάρμακα, ποτά, κρασί και άλλα προϊόντα.

Χαρακτηριστικά απόδοσης:

1. Λειτουργία επίδειξης: έγχρωμη οθόνη LCD, πίνακας διανομής βιντεοτηλέφωνου, προβολή πληροφοριών πλήρους πίνακα, λειτουργία οθόνης αφής

2. Λειτουργία δονούμενης πλάκας: Ταχύτητα δόνησης πλάκας επιπέδου 3, χρόνος 0-255 δευτερόλεπτα ρυθμιζόμενος

3. Σταθμός εργασίας: επαγγελματικό λογισμικό σήμανσης ενζύμων, το οποίο μπορεί να αποθηκεύσει 500 ομάδες προγραμμάτων, 100.000 αποτελέσματα δειγμάτων και να παρέχει πλούσιους τρόπους υπολογισμού όπως απορρόφηση, γραμμική εξίσωση, λογαριθμική εξίσωση, τετραγωνική εξίσωση, κυβική εξίσωση, ποσοστιαία συγκέντρωση απορρόφησης, λογαριθμική εξίσωση λειτουργία, ρυθμός αναστολής κ.λπ

Τεχνικές παράμετροι:

Πηγή φωτός: Εισαγόμενος λαμπτήρας αλογόνου DC12V 22W

Εύρος μήκους κύματος: 400-900 nm

Φίλτρο: 405, 450, 492, 630 nm στάνταρ, άλλα μήκη κύματος προαιρετικά

Εύρος ανάγνωσης: 0-4.000 Abs

Ανάλυση: 0,001 Abs

Σφάλμα ένδειξης:≤±0,01 Abs

Σταθερότητα:≤±0,003 Abs

Επαναληψιμότητα:≤ 0,3%

Διαστάσεις: 400mm×260mm×200mm

1 Αρχή και εφαρμογή

Αυτό το κιτ χρησιμοποιεί έμμεση ανταγωνιστική μέθοδο ELISA για την ανίχνευση της αφλατοξίνης Β1 (AFB1) σε σπόρους, ζωοτροφές και άλλα δείγματα. Το κιτ αποτελείται από επισημασμένη με ένζυμο πλάκα προεπικαλυμμένη με αντιγόνο σύζευξης, δείκτη ενζύμου χρένου, αντίσωμα, τυπικά και άλλα αντιδραστήρια που ταιριάζουν. Κατά τη διάρκεια της δοκιμής, προσθέστε το πρότυπο ή το διάλυμα δείγματος, η αφλατοξίνη Β1 στο δείγμα και η πλάκα ενζύμου προεπικαλύπτονται με το συζευγμένο αντιγόνο για να ανταγωνιστούν για το αντίσωμα κατά της αφλατοξίνης Β1. Αφού προσθέσετε τον ενζυμικό δείκτη, χρησιμοποιήστε το υπόστρωμα TMB για να αναπτύξετε το χρώμα. Η τιμή απορρόφησης του δείγματος συσχετίζεται αρνητικά με την περιεκτικότητα σε αφλατοξίνη Β1 που περιέχεται στο δείγμα. Η υπολειπόμενη ποσότητα της αφλατοξίνης Β1 στο δείγμα μπορεί να ληφθεί συγκρίνοντας με την τυπική καμπύλη.

2 Τεχνικοί δείκτες

2.1 Ευαισθησία κιτ: 0.03ppb (ng/ml)

2.2 Λειτουργία αντίδρασης: 25 ℃, 30 λεπτά ~ 15 λεπτά

2.3 Κατώτερο όριο ανίχνευσης:

Σιτηρά................................................. ..... 0,15ppb

Τροφοδοσία τύπου.......................................... 0,3 ppb

Βρώσιμο λάδι, φιστίκι................................. 0,6 ppb

Σάλτσα σόγιας, σιτάρι και άλλες ζωοτροφές.............................. 0,3 ppb

Μπύρα.......................................... 0,3 ppb

Κρασί, σάλτσα σόγιας, ξύδι................................... 0,15 ppb

2.4 Ρυθμός διασταυρούμενης αντίδρασης:

Αφλατοξίνη Β1 100%

2.5 Ποσοστό ανάκτησης δείγματος:

Δημητριακά και ζωοτροφές με παρασκευάσματα.............................. 85% ± 15%

Φιστίκι................................ 82 ± 15%

Βρώσιμο λάδι................................ 85 ± 15%

Σάλτσα σόγιας, σιτάρι και άλλες ζωοτροφές.............................. 83 ± 15%

Μπύρα................................. 84 ± 15%

Κρασί, σάλτσα σόγιας, ξύδι............ 87 ± 15%

3 Σύνθεση κιτ

Πλάκα ένδειξης ενζύμου................................. 96 οπές

Πρότυπο διάλυμα (μαύρο κάλυμμα): 1 ml το καθένα

0ppb,0,03ppb,0,06ppb,0,12ppb,0,24ppb,0,48ppb

Διάλυμα υψηλών προδιαγραφών: 100ppb.............................. 1ml

Ενζυμικός δείκτης (κόκκινο καπάκι)................................ 5,5ml

Διάλυμα εργασίας αντισωμάτων (μπλε καπάκι)................................ 5,5ml

Διάλυμα υποστρώματος Α (λευκό καπάκι).............................. 6ml

Υγρό υποστρώματος Β (μαύρο κάλυμμα).............................. 6ml

Τερματικό διάλυμα (κίτρινο καπάκι).............................. 6ml

20Χ συμπυκνωμένο διάλυμα πλυσίματος (λευκό κάλυμμα)...................... 40ml

Εγχειρίδιο οδηγιών.....................1 αντίγραφο

4 Απαιτούμενος εξοπλισμός και αντιδραστήρια

4.1 Συσκευή: ελεγκτής αφλατοξίνης, εκτυπωτής, ομογενοποιητής, συσκευή ξήρανσης αζώτου, ταλαντωτής, φυγόκεντρος, βαθμονομημένη πιπέτα, ισορροπία (ευαισθησία 0,01 g)

4.2 Μικροπιπέτα: μονοκάναλο 20 μl-200 μl, 100 μl-1000 μl, πολυκάναλο 300 μl

4.3 Αντιδραστήριο: μεθανόλη, ν-εξάνιο, τριχλωρομεθάνιο ή διχλωρομεθάνιο

5 Προεπεξεργασία δειγμάτων

5.1 Οδηγίες πριν από την επεξεργασία του δείγματος:

Η πειραματική συσκευή πρέπει να είναι καθαρή και να χρησιμοποιεί κεφαλή αναρρόφησης μιας χρήσης για την αποφυγή μόλυνσης και παρεμβολής στα πειραματικά αποτελέσματα.

5.2 Προετοιμασία διαλύματος:

Λύση 1: εκχύλισμα δείγματος

70% μεθανόλη, δηλαδή V μεθανόλη: V απιονισμένο νερό＝7:3.

5.3 Δείγματα βημάτων προεπεξεργασίας:

5.3.1 Μέθοδος επεξεργασίας σιτηρών

1) Ζυγίστε 2 g θρυμματισμένου δείγματος σε σωλήνα φυγοκέντρησης 50 ml, προσθέστε 5 ml διαλύματος εκχύλισης δείγματος, ανακινήστε για 5 λεπτά, 4000 rpm σε θερμοκρασία δωματίου/10 λεπτά κέντρου διαχωρισμού.

2) Πάρτε 0,5 ml υπερκειμένου, προσθέστε 0,5 ml απιονισμένου νερού και ανακατέψτε καλά.

3) Πάρτε 50 μ L Ανάλυση.

Λόγος αραίωσης δείγματος: 5 Κατώτερο όριο ανίχνευσης: 0,15 ppb

5.3.2 Μέθοδοι επεξεργασίας δειγμάτων με ισχυρή απορρόφηση νερού όπως φλοιός καλαμποκιού και πίτουρο σιταριού

1) Ζυγίστε 2 g θρυμματισμένου δείγματος σε σωλήνα φυγοκέντρησης 50 ml, προσθέστε 20 ml διαλύματος εκχύλισης δείγματος, ανακινήστε για 5 λεπτά, 4000 rpm σε θερμοκρασία δωματίου/10 λεπτά κέντρου διαχωρισμού.

2) Πάρτε 0,5 ml υπερκειμένου, προσθέστε 0,5 ml απιονισμένου νερού και ανακατέψτε καλά. (Για το δείγμα με εξαιρετικά υψηλή περιεκτικότητα σε τοξίνες, μπορεί να αραιωθεί με 35% μεθανόλη και στη συνέχεια να δοκιμαστεί. Για παράδειγμα, πάρτε 0,1 ml του αναμεμειγμένου διαλύματος σε 2) και 0,9 ml μεθανόλης 35% για ανάμειξη. Η τελική αναλογία αραίωσης δείγματος είναι 200 ​​και το όριο ανίχνευσης είναι 6 ppb.)

3) Πάρτε 50 μ L Ανάλυση.

Αναλογία αραίωσης δείγματος:20 Χαμηλότερο όριο ανίχνευσης:0,6ppb

Σημείωση: Επειδή η κατανομή της τοξίνης στο δείγμα είναι άνιση, είναι απαραίτητο να ληφθούν δείγματα από πολλά σημεία και να αναμειχθούν πλήρως πριν ληφθούν 2 g για δοκιμή.

5.3.3 Μέθοδος επεξεργασίας της τροφοδοσίας του παρασκευάσματος

1) Ζυγίστε 2 g θρυμματισμένου δείγματος σε σωλήνα φυγοκέντρησης 50 ml, προσθέστε 10 ml διαλύματος εκχύλισης δείγματος, ανακινήστε για 5 λεπτά, 4000 rpm σε θερμοκρασία δωματίου/10 λεπτά κέντρου διαχωρισμού.

2) Πάρτε 0,5 ml υπερκειμένου, προσθέστε 0,5 ml απιονισμένου νερού και ανακατέψτε καλά.

3) Πάρτε 50 μ L Ανάλυση.

Λόγος αραίωσης δείγματος: 10 Κατώτερο όριο ανίχνευσης: 0,3 ppb

5.3.4 Μέθοδοι επεξεργασίας ζωοτροφών με βρώσιμο λάδι, φιστίκια και υψηλή περιεκτικότητα σε λιπαρά

1) Ζυγίστε 2 g θρυμματισμένου δείγματος σε σωλήνα φυγοκέντρησης 50 ml, προσθέστε 8 ml n-εξανίου και 10 ml διαλύματος εκχύλισης δείγματος, ανακινήστε για 5 λεπτά, 4000 rpm σε θερμοκρασία δωματίου/10 λεπτά κέντρου διαχωρισμού.

2) Αφαιρέστε το πάνω υγρό, πάρτε 0,5 ml από το κάτω υγρό και προσθέστε 0,5 ml απιονισμένο νερό, ανακατέψτε καλά, μετά πάρτε 0,5 ml από το αναμεμειγμένο υγρό και προσθέστε 0,5 ml μεθανόλης 35%, ανακινήστε για 30 δευτερόλεπτα.

3) Πάρτε 50 μ L Ανάλυση.

Λόγος αραίωσης δείγματος: 20 Κατώτερο όριο ανίχνευσης: 0,6 ppb

5.3.5 Τρόφιμα ή καρυκεύματα όπως σάλτσες, σιτάρι, μπισκότα, αρτοσκευάσματα και μέθοδοι επεξεργασίας ζωοτροφών όπως συμπύκνωμα ζωοτροφών

1) Ζυγίστε 2 g θρυμματισμένου δείγματος σε σωλήνα φυγοκέντρησης 50 ml, προσθέστε 10 ml διαλύματος εκχύλισης δείγματος, ανακινήστε για 5 λεπτά, 4000 rpm σε θερμοκρασία δωματίου/10 λεπτά κέντρου διαχωρισμού.

2) Πάρτε 2 ml υπερκειμένου, προσθέστε 4 ml τριχλωρομεθάνιο (ή διχλωρομεθάνιο), ανακινήστε για 5 λεπτά, 4000 rpm σε θερμοκρασία δωματίου/10 λεπτά κέντρου διαχωρισμού.

3) Μεταφέρετε το επάνω υγρό σε άλλο δοχείο, αφήστε το κάτω υγρό για αναμονή, προσθέστε άλλα 4 ml χλωροφόρμιο (ή διχλωρομεθάνιο) στο πάνω υγρό, ανακινήστε πλήρως και ανακατέψτε για 5 λεπτά και η θερμοκρασία δωματίου είναι 4000 rpm/κέντρο διαχωρισμού για 10 λεπτά?

4) Αφαιρέστε το πάνω υγρό, συνδυάστε το κάτω υγρό δύο φορές και ανακατέψτε πλήρως.

5) Πάρτε 2 ml του συνδυασμένου κατώτερου υγρού και στεγνώστε το με φυσητήρα κάτω από 50-60 ℃ άζωτο.

6) Προσθέστε 0,5 ml εκχυλίσματος δείγματος για να διαλυθεί πλήρως η αποξηραμένη ουσία και στη συνέχεια προσθέστε 0,5 ml απιονισμένου νερού για ανάμειξη.

7) Πάρτε Ανάλυση 50 μ L.

Λόγος αραίωσης δείγματος: 10 Κατώτερο όριο ανίχνευσης: 0,3 ppb

5.3.6 Μέθοδος επεξεργασίας μπύρας

1) Ανακατέψτε πλήρως τη μπύρα (αφαιρέστε το CO2), πάρτε 2 ml δείγματος μπύρας, προσθέστε 1 ml απεσταγμένου νερού, προσθέστε 7 ml μεθανόλης και ανακινήστε για 5 λεπτά.

2) Πάρτε 0,5 ml μικτού διαλύματος δείγματος και προσθέστε 0,5 ml απιονισμένου νερού για να αναμειχθεί καλά.

3) Πάρτε 50 μ L Ανάλυση.

Λόγος αραίωσης δείγματος: 10 Κατώτερο όριο ανίχνευσης: 0,3 ppb

5.3.7 Μέθοδος θεραπείας με κρασί, σάλτσα σόγιας και ξύδι

1) Πάρτε 2 ml δείγματος, προσθέστε 2 ml απεσταγμένου νερού, προσθέστε 10 ml τριχλωρομεθανίου (ή διχλωρομεθανίου), ανακινήστε για 5 λεπτά, 4000 rpm σε θερμοκρασία δωματίου/10 λεπτά κέντρου διαχωρισμού.

2) Πάρτε 1 ml από το χαμηλότερο υγρό και στεγνώστε το με φυσητήρα κάτω από 50-60 ℃ άζωτο.

3) Προσθέστε 0,5 ml εκχυλίσματος δείγματος για να διαλυθεί πλήρως η αποξηραμένη ουσία, στη συνέχεια προσθέστε 0,5 ml απιονισμένου νερού και ανακατέψτε καλά.

5) Πάρτε Ανάλυση 50 μ L.

Λόγος αραίωσης δείγματος: 5 Κατώτερο όριο ανίχνευσης: 0,15 ppb

6 Βήματα ELISA

Αφαιρέστε το απαιτούμενο αντιδραστήριο από το περιβάλλον αποθήκευσης 4 ℃ και τοποθετήστε το σε θερμοκρασία δωματίου για περισσότερο από 30 λεπτά. Ενδέχεται να υπάρχουν κρύσταλλοι που πρέπει να αποκατασταθούν σε θερμοκρασία δωματίου για να διαλυθούν πλήρως όταν το διάλυμα πλυσίματος είναι ψυχρή αποθήκευση. Κάθε υγρό αντιδραστήριο πρέπει να ανακινείται πριν από τη χρήση. Αφαιρέστε τον απαιτούμενο αριθμό μικροπορωδών πλακών και πλαισίων, βάλτε τις αχρησιμοποίητες μικροπορώδεις πλάκες σε αυτοσφραγιζόμενες σακούλες και αποθηκεύστε τις στους 2-8 ℃.

Πριν από το πείραμα, 20 × Το συμπυκνωμένο διάλυμα πλύσης αραιώνεται σε διάλυμα εργασίας πλύσης κατά 20 φορές.

6.1 Αρίθμηση: αριθμήστε τα αντίστοιχα φρεάτια του δείγματος και του προτύπου με τη σειρά, κάντε δύο παράλληλες οπές για κάθε δείγμα και πρότυπο και καταγράψτε τη θέση της τυπικής οπής και της οπής δείγματος.

6.2 Αντίδραση προσθήκης δείγματος: προσθέστε 50 μl/φρεάτιο προτύπου ή δείγματος στις αντίστοιχες κοιλότητες, στη συνέχεια προσθέστε 50 μl/φρεάτιο δείκτη ενζύμου, στη συνέχεια προσθέστε 50 μl/φρεάτιο διαλύματος εργασίας αντισώματος, σφραγίστε την πλάκα με μια πλάκα κάλυψης μεμβράνη, ανακινήστε απαλά για 5 δευτερόλεπτα, ανακατέψτε και αντιδράστε στους 25 ℃ για 30 λεπτά.

6.3 Πλύσιμο: Αφαιρέστε προσεκτικά τη μεμβράνη της πλάκας κάλυψης, στεγνώστε το υγρό στην τρύπα, πλύνετε πλήρως την τρύπα με διάλυμα εργασίας πλύσης 250 µl/τρύπα για 5 φορές, με μεσοδιάστημα 30 δευτερολέπτων, και στεγνώστε τη με απορροφητικό χαρτί (το φυσαλίδες που δεν αφαιρούνται μετά το κτύπημα μπορούν να τρυπηθούν με καθαρή κεφαλή πιστολιού).

6.4 Ανάπτυξη χρώματος: Προσθέστε 50 μl διαλύματος υποστρώματος Α και 50 μl διαλύματος υποστρώματος Β σε κάθε τρύπα, ανακινήστε απαλά για 5 δευτερόλεπτα και ανακατέψτε καλά και αποκτήστε χρώμα στο σκοτάδι στους 25 ℃ για 15 λεπτά.

6.5 Τερματισμός: Προσθέστε 50 µl διαλύματος τερματισμού σε κάθε οπή, ανακινήστε απαλά και ανακατέψτε καλά για να τερματιστεί η αντίδραση.

6.6 Μέτρηση τιμής απορρόφησης: χρησιμοποιήστε τον ελεγκτή αφλατοξίνης για να μετρήσετε την τιμή απορρόφησης κάθε οπής στα 450 nm (συνιστάται διπλό μήκος κύματος 450/630 nm). Ο προσδιορισμός ολοκληρώνεται εντός 10 λεπτών μετά τον τερματισμό της αντίδρασης

6.7 Ο αυτόματος ελεγκτής αφλατοξίνης ST-2000A ολοκληρώνει αυτόματα τον προσδιορισμό και παράγει αυτόματα τα αποτελέσματα.